2023, 31(5):160-169.
摘要:
:黄曲霉毒素 B1
(aflatoxin B1, AFB1)适配体共价偶联于磁珠表面制备适配体亲和磁珠(aptamer
affinity magnetic beads, AAMB),将 AAMB、孵育液、洗涤液和洗脱液预封装于试剂条中开发了 AFB1
单样本前处理试剂盒,借助真菌毒素全自动净化仪实现了 AFB1 前处理的自动化,使用超高效液相色
谱仪对洗脱液中 AFB1 的含量进行测定。通过优化磁珠粒径、适配体间接臂长度、适配体亲和磁珠用
量、孵育液体积确定了 AAMB 的制备条件以及 AFB1单样本前处理试剂盒的使用条件,对比了手动和
自动两种前处理方式下 AAMB 回收率的差异。在优化条件下,AFB1的检出限(limit of detection, LOD)
为 0.6 ng/mL,玉米和小麦中低、中、高三个水平的加标回收率在 92.8%~110.1%之间,日内精密度的
相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于 5.1%,日间精密度的 RSD 为 6.7%,具有良好的
灵敏度、准确性和重复性;粮油基质(玉米、糙米、花生油和花生酱)中 AFB1 成分国家有证标准物
质的测定结果在其扩展范围内,具有良好的基质适用性。开发的单样本前处理试剂盒借助真菌毒素全
自动净化仪仅需一步操作即可在 20 min 内自动完成 10 个样品的前处理,具有时间短、通量高、批次
间差异小的优点,在真菌毒素定量检测方面具有良好的应用前景,为开发针对其它靶标的自动化前处
理方法奠定了基础。