粮油食品科技

中国科学引文数据库(CSCD)收录期刊
2023年版《中文核心期刊要目总览》收录期刊
中国科技核心期刊
科创中国“2022、2023科技期刊双语传播工程”入选期刊
“2022中国精品期刊展”入选期刊
荷兰Elsevier-Scopus数据库收录期刊
瑞典DOAJ(开放存取期刊目录)收录期刊
美国EBSCO学术数据库收录期刊
美国《化学文摘》(CA) 收录期刊
英国《食品科技文摘》(FSTA)收录期刊
日本科学技术振兴机构(中国文献数据库)(JSTChina)收录期刊
美国《乌利希国际期刊指南》(UPD)收录期刊

转基因小麦外源基因插入位点初步分析及检测方法的建立
DOI:
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

基金项目:


Preliminary analysis of insertion site of transgenic wheat exogenousgene and the establishment of detection method
Author:
Affiliation:

Fund Project:

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
    摘要:

    利用染色体步移(genome-walking)原理和巢式PCR方法,对转基因小麦外源基因sGNA插入位点的序列特征进行了分析,并以此建立了sGNA基因转化事件特异性检测的方法。根据sGNA基因的核苷酸序列设计特异引物,利用Takara公司提供的简并随机引物,通过染色体步移法扩增到了转sGNA基因株系zy2-18的插入位点的边界序列,分析得到的边界序列可知,外源基因片段是通过部分同源重组的方式与小麦基因组进行整合的,整合位点位于A染色体组。检测结果显示携带外源基因sGNA的质粒在与小麦基因组整合的过程中发生了剪切,且Ubi启动子与bar基因被切除,保留了两个串联的NOS基因,且在4 500~4 520 bp区间发生了重组后的缺失,而在4 786~4 810 bp区间有一段碱基序列插入,导致插入区段的小麦基因组序列发生重排,初步分析外源基因是通过同源重组的方式进行整合的。通过验证,证明了插入位点信息的准确性,并初步判断插入位点位于小麦A染色体组。因此,随机引物法genome-walking可以作为转基因小麦安全检测及身份识别的有效方法。

    Abstract:

    The sequence character of insertion site of transgenic wheat exogenous gene sGNA was analyzed by genome-walking and the Nested-PCR methods, and the method of detection of sGNA gene transform event specificity was established. The random primers were supplied by Takara and the specific primers were designed based on the sGNA sequence. The boundary sequences of sGNA were cloned by genome-walking, and located on genome A by the homologous recombination. The Ubi promoter and bar gene of the plasmid with exogenous gene sGNA were cut off during the integration process, and two series of NOS genes were remained, the deletion was resulted in 4 500~4 520 bp, and insertion of a segment of base sequence was discovered between 4 786 bp to 4810 bp, which resulted the rearrangement of wheat genome sequence. The accuracy of the insertion site information was verified, so it′s effective and feasible of genome-walking for the detection of safety and identification of transgenic wheat.

    参考文献
    相似文献
    引证文献

当期目录


年第卷第

文章目录

过刊浏览

引用本文

段晓亮,许兰杰,刘志勇,梁荣奇.转基因小麦外源基因插入位点初步分析及检测方法的建立[J].粮油食品科技,2014,22(4):76-81.

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期: 2014-07-29
  • 出版日期: